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色譜柱的種類與評(píng)價(jià)

更新日期: 2015-12-04
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一般地說(shuō),根據(jù)樣品的性質(zhì)決定采用何種液相色譜方法,然后再選擇不同類型的柱。即不同類型的柱則代表了不同的色譜方法。

    不同種類色譜柱的差異在于柱結(jié)構(gòu)、柱填料和柱尺寸的不同。

    色譜柱有不同的尺寸(長(zhǎng)度和內(nèi)徑),分制備型、常規(guī)分析型和微型。不同類型柱的硬件也不同,(包括接頭、柱管等方面),還有徑向加壓柱和夾套加熱柱等。

    不同液相色譜法的尺寸根據(jù)需要可以選取,普通分析3~30cm長(zhǎng),內(nèi)徑4~8mm。常用20cm長(zhǎng)、4.6mm內(nèi)徑的柱。制備型柱內(nèi)徑一般為8mm、25cm長(zhǎng)。微型柱內(nèi)徑l~3mm,長(zhǎng)10~20cm。不同的填料分析的效果可能不同,這是因?yàn)樯a(chǎn)過(guò)程不同所致。同一廠商生產(chǎn)的同種填料因批號(hào)不同也會(huì)有差異,這種差異可能從基質(zhì)就開(kāi)始(表面積、雜質(zhì)、特殊處理),還有鍵合的化學(xué)物質(zhì)(一氯或三氯硅烷反應(yīng)劑),不同廠家生產(chǎn)的填料還會(huì)因技術(shù)(預(yù)處理、鍵合過(guò)程、填裝技術(shù))等不同而呈現(xiàn)較大差異。由于種種差異、僅能假設(shè)同一批號(hào)的柱有基本相同的性質(zhì)。

    多數(shù)柱填料基質(zhì)采用多孔硅膠微粒,通常有球形和無(wú)定形兩種,具有不同的粒度、孔徑和表面積。多孔聚合物微粒也適用于反相色譜。聚合物柱的流動(dòng)相范圍廣,流動(dòng)相pH值可在1至13之間。而硅膠基質(zhì)pH僅能在2.5和7之間。顯然,聚合物柱要好一些,但目前仍是以硅膠基質(zhì)的柱為主。原則上,聚合物柱可以克服硅膠基質(zhì)柱的某些不足,但需要大量的實(shí)驗(yàn)來(lái)證實(shí),要進(jìn)一步考查聚合物基質(zhì)填料的全面*性。

    在實(shí)際工作中,選擇性能良好的色譜柱可得到好的結(jié)果,首先要注意柱徑、長(zhǎng)度、填料種類和填料粒度。

    評(píng)價(jià)色譜柱的好壞不僅只是N數(shù),還應(yīng)考慮組分在柱上的保留、鍵合相表面的物性、柱壓降以及峰不對(duì)稱因子As等。每一根新色譜柱都應(yīng)標(biāo)出詳細(xì)參數(shù),主要內(nèi)容包括公司名稱、柱名稱(商標(biāo))、柱填料、尺寸。附一張標(biāo)準(zhǔn)參考色譜圖,并標(biāo)出色譜條件、樣品名稱、流動(dòng)相組成、流速、柱溫、進(jìn)樣體積、檢測(cè)器、峰的保留時(shí)間及峰名稱等。評(píng)價(jià)一根色譜柱的主要指標(biāo)是:①塔板數(shù)N值;②峰不對(duì)稱因子As;③柱壓降;④鍵合相濃度。

 

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